Indicador de ágar de álcool feniletílico forex

BISC209: Meio seletivo, e ou diferencial, e / ou enriquecido Wellesley College-BISC 209 Microbiologia - Primavera 2018 Bem-vindo ao Laboratório de microbiologia Leia-me: Lab Safety CalendarWeekly Planner Resources OWW Basics LAB 1: Microbiology Boot Camp LABS 2-12: Soil Communities amp Diversity Project Assignments Protocolos Diferencial Diferencial Diferencial de mídia de enriquecimento A mídia seletiva ajuda a selecionar o crescimento de certos organismos em uma população mista usando um ingrediente que inibe o crescimento de outros microrganismos, mas não a espécie ou grupo desejado. Os meios de enriquecimento selecionam certos microrganismos, incluindo um nutriente que o microrganismo ou grupo desejado pode usar e seus competidores não podem. (Às vezes, o meio de enriquecimento também limita fontes alternativas de nutrição). A mídia diferencial não seleciona para nenhum grupo particular, inibindo ou aumentando seu crescimento em relação aos concorrentes, mas mostra uma diferença visível entre ou entre grupos de microorganismos. Algumas mídias podem ser seletivas e diferenciais. Para obter mais informações sobre as formulações e os tipos de mídia disponíveis em microbiologia, consulte: Sistemas de diagnóstico BD Difco catálogo de mídia bddstechnicalCenterinsertsdifcoBblManual. asp Seletivo para organismos Gram positivos Agente de álcool feniletil (PEA) O PEA seleciona o crescimento de organismos Gram positivos inibindo o crescimento de Bacilos Gram negativos. O álcool feniletílico interfere com a síntese de DNA em organismos Gram-negativos. Este meio é particularmente útil para inibir o crescimento excessivo de espécies de Proteus Gram negativas que tendem a enxerrar (são altamente móveis) e, portanto, tornam difícil o isolamento de organismos Gram positivos em uma população mista. Receita. 10 g de triptose, 3 g de extracto de carne, 5 g de cloreto de sódio, 2,5 g de álcool feniletil, 15 g Agar para 1 litro de água destilada ou desionizada pH 7,1-7,5. Manitol Salt Agar (uma alternativa ao PEA, não utilizado em 2018) Organismo de controle positivo: Staphylococcus epidermidis Seletivo para organismos Gram negativos O Agar EosinMethylene Blue (EMB) é um meio diferencial para a detecção de bactérias entéricas Gram negativas. O meio contém pinturas de peptona, lactose, sacarose, fosfato dipotássico, eosina e azul de metileno. Eosina e azul de metileno atuam como indicadores para diferenciar organismos Gram-negativos que fermentam a lactose e aqueles que não fermentam a lactose. A maioria das bactérias que fermentam a lactose formam colônias em agar EMB que são de azul escuro a preto com um brilho metálico devido à precipitação dos corantes pelos subprodutos ácidos da fermentação. As colônias produzidas por fermentadores de lactose não são de azul escuro ou de preto. O crescimento de bactérias Gram positivas é geralmente inibido em agar EMB devido à toxicidade do corante azul de metieno. Em baixa concentração, a membrana lipídica protetora externa das bactérias Gram negativas evita a entrada do tinte tóxico solúvel em água, enquanto a parede celular mais porosa das bactérias Gram positivas sem a membrana externa protetora torna mais sensíveis à toxicidade do azul de metieno. Receita: 10 g de peptona, 10 g de Lactose, 2 g de fosfato de dipotássio, 0,4 g de eosina Y, 0,065 g de azul de metileno 15 g Agar. PH final 6.9-7.3 Tabela 2. Aparência colonial em EMB Agar após 18-24 horas a 35C. Um meio diferencial pode ser usado para diferenciar organismos entéricos Gram-negativos com base na cor da colônia. FATO DOS MÍDIA SELECTIVA E DIFERENCIAL Muitos tipos diferentes de mídia são utilizados no laboratório de microbiologia. Em geral, esses meios de comunicação podem ser divididos em várias categorias, incluindo nutritivo, diferencial e seletivo. Os meios nutricionais são definidos como tipos de mídia que suportam o crescimento de uma ampla gama de microorganismos. Esses tipos geralmente são considerados não seletivos devido ao fato de que eles vão crescer a maioria dos organismos. Exemplos de meios nutritivos incluem agar de soja tríptico, agar nutritivo e agar de sangue. Os tipos médios diferenciais são aqueles que distinguem os microrganismos um do outro com base em características de crescimento evidentes quando cultivadas em tipos médios específicos. Organismos com diferentes características de crescimento geralmente mostram diferenças visíveis de crescimento quando colocadas em meios diferenciais. Os exemplos incluem agar de sangue, agar de Eosin Methylene Blue (EMB), agar de sal de mannitol e agar MacConkey. Os tipos de meio seletivo são formulados para apoiar o crescimento de um grupo de organismos, mas inibem o crescimento de outro. Esses meios de comunicação contêm antimicrobianos, corantes ou álcool para inibir o crescimento dos organismos não visados ​​para estudo. Os tipos de meio seletivos incluem agar EMB, agar de sal de mannitol, ágar MacConkey e agar de feniletil álcool (PEA). Alguns meios de comunicação podem possuir propriedades seletivas e diferenciais, permitindo-lhes desenvolver certos grupos de organismos de interesse e dar ao investigador uma maneira de discernir diferenças no grupo com base em uma reação visível com a mídia. Esses meios de comunicação podem ser poderosas ferramentas de diagnóstico em configurações médicas e ambientais. Eosina Methylene Blue agar (agar EMB) contém os corantes eosina e azul de metileno. Eles inibem os organismos Gram-positivos. Esse meio é seletivo para espécies Gram-negativas. Os organismos que fermentam a lactose, como E. coli, produzem um precipitado preto na EMB. Suas colônias serão pretas ou possuem centros obscuros com periferias transparentes e incoloras. Fermentadores sem lactose, como Proteus sp. Salmonella sp. Ou Shigella sp. Parece cor-de-rosa ou incolorido. Assim, o meio é considerado diferencial em relação à fermentação da lactose. MacConkey agar é semelhante ao agar EMB, pois também é seletivo para espécies Gram-negativas e diferencial em relação à fermentação da lactose. O agar MacConkey é utilizado para a detecção de coliformes e patógenos entéricos com base na sua capacidade de fermentar a lactose. As bactérias fermentadoras de lactose aparecem de vermelho a rosa, enquanto as bactérias que não fermentam lactose aparecem como colônias incoloras ou transparentes. O agar de sal de mannitol (7,5 NaCl) é um meio seletivo para estafilococos e diferencial em relação à fermentação com manitol. O crescimento da maioria das bactérias que não sejam estafilococos, que são halofílicos, é inibido pela alta concentração de sal no meio. A fermentação do manitol só é vista nas espécies patogênicas de Staphylococcos e é sinalizada pela produção de produtos ácidos que conduzem o fenol vermelho na mídia para mudar de um vermelho-laranja neutro a amarelo brilhante. Os estafilococos não patogênicos produzem pequenas colônias cercadas por zonas vermelhas ou rosa-roxas devido à produção de produtos básicos por produtos devido ao metabolismo. O agar de feniletil álcool (PEA) é um meio seletivo que inibe o crescimento da maioria dos organismos Gram negativos. O álcool feniletil atua para interromper a estrutura lipídica na membrana de organismos Gram negativos, além de inibir a síntese protéica, levando ao crescimento fraco desses organismos no meio. O crescimento de organismos Gram negativos neste meio tende a ser atrofiado ou completamente interrompido. Blood Agar (5 Sheeps Blood-TSA) é um meio nutritivo com propriedades diferenciais em relação à hemólise. Hemólise é a destruição de eritrócitos (RBCs). O grau em que os eritrócitos são destruídos pode ser reconhecido pelos efeitos das enzimas hemolíticas nas células no meio. A degradação completa dos glóbulos vermelhos é denominada hemólise beta (946) e é reconhecida pela limpeza das colônias criando a hemolisina. A destruição parcial dos glóbulos vermelhos leva a uma cor marrom esverdeada no ágar e é denominada hemólise alfa (945). A hemólise Gamma (947) é geralmente o termo aplicado ao crescimento em agar de sangue que não causa nenhum dano aos RBCs e nenhuma alteração no meio. Parte 1: mídia seletiva e diferencial Cada grupo de mesa precisará das seguintes 2 placas de agar EMB 2 placas de ágar MacConkey 2 Placa de agar de sal de mannitol 2 placas de agar PEA Serão fornecidas culturas dos seguintes organismos: